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ForteBio代理
產品時間:2021-10-28
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八位字節 K2 系統

Octet® K2 2 通道系統讓您訪問精致的生物分子相互作用數據。為初創學術和生物技術實驗室定價,小批量用戶在選擇無標記分析系統時不再受成本和性能之間的權衡的束縛。Octet K2 系統表征蛋白質-蛋白質和蛋白質-小分子結合相互作用,用于早期研究和發現。該多用途系統還通過測量活性蛋白濃度提供定量信息——即使是在細胞培養上清液和裂解液等復雜混合物中。

 

 

小分子分析的靈敏度

Octet K2 系統能夠測量小至 150 Da 的小分子與其較大的結合伙伴之間的相互作用,以確定準確的動力學速率。

 

 

靈活的第二通道用作參考或更多樣品

*的 2 通道設計具有用于同時參考或增加容量的專用光譜儀。

 

 

蛋白質和抗體表征的簡單設置

模板驅動的界面允許新用戶快速開始蛋白質和抗體表征。

 

2 通道入門級 Octet 系統:Octet K2

 

技術

 

基于光纖生物傳感器的生物層干涉測量 (BLI)

 

樣品量

 

180–220 µL/

無損檢測,易于回收

 

數據呈現

 

顯示動力學軌跡或濃度結合率的傳感圖

表位合并和交叉阻斷矩陣和軌跡疊加

制表的動力學或濃度數據

 

自動化

 

最多可同時進行 2 次檢測

 

軌道流量

 

靜態或 400–1500 rpm

 

分析溫度

 

環境溫度 + 4°C 40°C,以 1°C 為增量

 

結合率常數 (k a )

 

10 1 10 7 M -1 S -1

 

解離速率常數 (k d )

 

10 -6 10 -1-1

 

親和常數 (K D )

 

1 毫米 – 10 下午

 

基線噪聲 (RMS)

 

<3.5 下午

 

基線漂移

 

< 0.1 納米/小時

 

定量范圍

 

0.05 μg/mL 2000 μg/mL(人 IgG 和蛋白 A 生物傳感器)

依賴于蛋白質和測定

 

定量精度

 

簡歷 <10%

 

重量

 

58 磅(26.3 公斤)

 

尺寸(高 x x 深)

 

18.6 英寸(高)x 17 英寸(深)x 20.8 英寸(

寬)47 厘米(高)x 43 厘米(深)x 53 厘米(寬)

樣品類型

 

蛋白質、抗體、肽、含血清的培養基(高達 25%)、含 DMSO 的緩沖液、病毒樣顆粒、未處理的細胞培養上清液和粗細胞裂解物

 

樣板

 

標準、96 孔、黑色、平底微孔板

 

分子量檢測

 

>150

Fortebio 公司的超級鏈霉親和素(ssa)生物傳感器主要是用于小分子應用的生物傳感器。當用作參考表面時,ssabiosensors 通常被 biocytin 阻塞(有關運行小分子分子量分析的更多細節,請參見技術說明16,小分子結合動力學)。然而,這個參考表面的光學特性不同于目標表面的光學特性,可能是由于光深度的增加伴隨著目標生物傳感器蛋白質層的增加。對于高靈敏度的應用,這種差異可能在原始數據中引入較小的人為因素,導致在評估化合物或負性控制時的變異性略高。當使用這里描述的引用方法時,與標準的引用方法相比,模型系統緩沖控制產生的信號標準差要低1-3 pm。這個結果非常重要,因為下午1-3點的標準差轉化為下午3-9點的檢測限的差異(其中 llod = 3 x 標準差 + 平均背景信號) ,這對于從那些接近背景水平的信號中區分真實信號非常重要。

選擇一個蛋白質作為參考生物傳感器,最佳的參考蛋白質是一個與目標蛋白質相同,但不結合感興趣的分子。有些群體很幸運,有不活躍的蛋白質突變體,這些是創建參考生物傳感器的理想參考蛋白。如果有這種蛋白質,它應該與目標蛋白質進行類似的生物素化(見技術說明6,將蛋白質進行生物素化固定在鏈霉親和素生物傳感器上,以及技術說明12,將極少量的蛋白質進行生物素化固定在鏈霉親和素生物傳感器上)。為達到最佳效果,生物素化參考蛋白應以類似于目標蛋白的密度裝載到 ssa 生物傳感器上。生物素化參考蛋白可以按照這里描述的方法進行檢測。更常見的是,不活躍的蛋白質版本不可用,必須使用替代物。鏈霉親和素的阻斷形式是一個有用的替代品ーー在作為參考的 ssa 生物傳感器上增加一層阻斷鏈霉親和素,使目標和參考生物傳感器的光學特性更加相似。為了達到最佳效果,參考蛋白的負載信號應該與目標蛋白的負載信號相似。下面的協議創建生物素化,阻斷鏈霉親和素(sav-b4) ,并描述了如何使用它在參考生物傳感器。

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