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HCP免疫測定
宿主細胞蛋白（HCP）構成了使用細胞培養(yǎng)技術生產(chǎn)的生物藥物中與過程相關的主要雜質。HCPs是在重組生物藥物表達過程中無意中產(chǎn)生的，如從宿主細胞中分泌，由于細胞應激以及在生物過程制造過程中細胞裂解引起的異常細胞運輸所致。CHO細胞可產(chǎn)生70％以上的生物原料藥，但 大腸桿菌， 巴斯德畢赤酵母， HEK 293細胞和HEK 293細胞也是常見的表達平臺。無論使用哪種電池類型，HCP都是與工藝相關的主要雜質。由于宿主細胞蛋白（HCP）可能給患者帶來風險并影響藥物的功效和穩(wěn)定性，因此必須設計生物制藥純化工藝以去除盡可能多的HCP。申請IND（研究用新藥）時需要HCP清除，以降低臨床試驗的風險。
健壯且具有廣泛反應性的宿主細胞蛋白（HCP）酶聯(lián)免疫吸附測定（ELISA）是監(jiān)測純化過程一致性以及最終原料藥純度的關鍵工具，是HCP產(chǎn)品監(jiān)測和釋放測試的金標準方法。HCP ELISA可以在mg / ml水平的產(chǎn)品蛋白質存在的情況下測量ng / ml水平的HCP，不需要專門的技術來運行，并且很容易在整個組織中從過程開發(fā)到制造質量控制組轉移。
“免疫測定方法依賴于能夠盡可能廣泛地識別進入下游純化過程的HCP群體的抗體；因此，用多克隆抗體設計的夾心免疫測定是HCP監(jiān)測和定量的主要手段。這種測定形式提供了高靈敏度，特異性，通量，自動化潛力，快速周轉，定量結果和每次測定的低成本的組合，這是任何其他當前可用的測定技術所。” – USP第1132章，3。HCP免疫測定方法
同時，HCP ELISA需要高水平的專業(yè)知識才能開發(fā)出具有廣泛反應性的HCP抗體，然后將其轉變?yōu)闇蚀_，靈敏，特異且穩(wěn)定的分析方法。此外，ELISA無法提供有關最終藥物中存在的單個HCP的信息，正在識別哪些HCP或測定是否具有廣泛的反應性。
世界各地的監(jiān)管機構已采取措施，確保發(fā)起人使用的HCP ELISA適合監(jiān)測純化過程的一致性和產(chǎn)品批次的釋放。建議采用 正交方法， 例如抗體親和提?。?/span>AAE™）免疫親和色譜結合2D-PAGE和/或 質譜（MS） 方法來證明抗體對單個HCP的覆蓋率，以支持HCP ELISA適用于目的。同樣重要的是使分析的稀釋度線性，準確性和精密度合格。
Cygnus提供 用于21種不同細胞系的通用 HCP ELISA試劑盒，*的 正交抗體覆蓋分析服務， 通過AAE-MS™在過程樣品和藥物中進行 HCP鑒定，通用 化驗鑒定服務 以及特定于過程的抗體和化驗開發(fā)服務的專業(yè)知識 。
Cygnus的質量聲譽已得到業(yè)界和全球監(jiān)管機構的認可，并提供了多種通用的HCP ELISA試劑盒來支持上市的生物制劑。Cygnus的專有技術還被用于為許多全球生物制藥公司開發(fā)100多種特定于過程的抗體和免疫測定法。
[1] Durocher，V.等。生物技術雜志。2017年
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