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BirA500 avidity華新康信
產品時間:2020-02-25
北京華新康信生物科技有限公司代理avidity品牌。北京華新康信生物科技有限公司是avidity 品牌代理商。BirA500 avidity大量現貨,歡迎選購,合作共贏。BirA500 avidity華新康信,歡迎電聯。

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產品列表如下:

BirA500  BirA biotin-protein ligase standard reaction kit     avidity

BirA500-BirA-500:BirA生物素蛋白連接酶標準反應試劑盒,

BirA生物素蛋白連接酶(EC 6.3.4.15)激活生物素形成5'-腺苷酸生物素,并將生物素轉移生物素受體蛋白(如AviTag™肽)。它還起著生物素操縱子阻遏物的作用。該蛋白質由birA基因編碼。

請注意:我們強烈建議使用AviTag™氨基酸序列,而不是其他生物素肽序列。BirA酶以2倍于天然底物(BCCP)的反應速率對AviTag™序列進行生物素化處理,并且比使用中的其他肽序列高出一個數量級或更多。與其他Biotinylation-of-Peptide序列相比,AviTag™需要較少的酶量和較短的孵育時間,從而大程度地減少了與蛋白酶和蛋白質不穩定性相關的輔助問題。

產品信息

套件隨附以下物品:

兩(2)個小瓶,每瓶20uL 1mg / mL BirA生物素蛋白連接酶(總共40ug)

兩(2)個小瓶,每個1.5mL BiomixA(0.5M Bicine緩沖溶液,pH 8.3)

兩(2)個每瓶1.5mL的BiomixB(100mM ATP,100mM Mg(OAc)2、500uM d-生物素)

兩(2)個每小瓶1.5mL的BIO-200(500uM d-生物素)

BirA生物素蛋白連接酶(EC 6.3.4.15)通過ATP中間體(生物素5'-腺苷酸)以高效且有針對性的方式將d-生物素共價添加到生物素受體肽/蛋白質上。酶促生物素化蛋白的下游應用是多種,重要和強大的。通常利用*的生物素-親和素/鏈霉親和素相互作用來進行親和層析或將蛋白質固定在表面或底物上。通過抗生物素抗體或抗生物素蛋白/鏈霉親和素-報告酶偶聯物(-HRP,-堿性磷酸酶)或熒光探針進行蛋白質檢測成為可能。生物素化的MHC分子的多聚體形式是免疫生物學中流行的工具。

當與我們的AviTag™生物素受體肽氨基酸序列結合使用時,生物素化的發生率是自然大腸桿菌BCCP底物的兩倍,并且比其他肽序列的生物素化高出一個數量級或更多。因此,與其他可用序列相比,AviTag™序列需要較少的BirA酶和較短的孵育時間即可完成生物素化反應。如果需要考慮蛋白質的不穩定性或蛋白酶活性,這對于下游的成功可能很重要。

我們的BirA酶是野生型大腸桿菌,由birA基因編碼,并通過傳統方法純化純度超過99%。該酶的其他名稱包括:生物素連接酶;生物素操縱子阻遏蛋白 birA; 生物素全酶合成酶;生物素-[乙酰-CoA羧化酶]合成酶;生物素-[乙酰-CoA-羧化酶]連接酶;生物素-[乙酰-CoA羧化酶]合成酶;乙酰輔酶A全羧化酶合成酶;乙酰輔酶A全羧化酶合成酶;生物素:脫羧羧化酶連接酶;生物素全酶合成酶;HCS。

BIS-300-BIS-300陽性和陰性對照蛋白試劑盒,

的BIS-300試劑盒包含生物素化的*MBP-shRNA表達克隆TM融合蛋白標準和未生物素化MBP-shRNA表達克隆TM,其可以被用作用于生物素化酶BirA生物素-蛋白連接酶的反應的“范圍的-生物素化”的比較的融合蛋白,用于SDS- PAGE凝膠分析或蛋白質印跡分析。

產品信息

套件隨附以下物品:

一(1)小瓶,其中含有50μL*生物素化的MBP-AviTag TM融合蛋白,濃度為1mg / mL(50μg)。

一(1)小瓶,其中包含100μL的未生物素化MBP-AviTag TM融合蛋白,濃度為1mg / mL(100μg)。

通過將已知量的100%生物素化的AviTag TM融合蛋白作為標準品與已知量的BirA反應的目的蛋白(以ELISA型多孔稀釋形式)進行比較(用于生物素化反應滴定分析的稱為BRTA)可以以高度準確和可再現的方式評估您自己的BirA生物素化反應中實現的生物素化程度。

此外,在SDS-PAGE和Western印跡上可見的生物素化和未生物素化融合蛋白之間的質量轉移可用于通過觀察混合群體中條帶密度的差異來主觀確定反應中發生的生物素化量。生物素化與非生物素化的底物。

BIS-300試劑盒包含用于BRTA方案的*生物素化的標準品和未生物素化的AviTag'd蛋白質,可與您的BirA /蛋白質生物素化反應平行進行反應,作為陽性對照。可以在此處找到指向BRTA協議的鏈接。

BIO500-BIO-500生物素解決方案

10mL的5mM d-生物素溶液用于體內生物素化培養誘導,涉及pBirAcm BirA過表達質粒和AviTagTM-蛋白融合載體,或可能需要額外d-生物素的超大規模BirA反應。隨附:1管d-生物素溶液;10mL在5mM; 長期儲存在-20 o C

產品信息

10mL的5mM d-生物素溶液用于體內生物素化培養誘導,涉及pBirAcm BirA過表達質粒和AviTagTM-蛋白融合載體,或可能需要額外d-生物素的超大規模BirA反應。隨附:1管d-生物素溶液;10mL在5mM; -20°C長期保存

呈遞抗C末端的單克隆抗體

開發了一種單克隆抗體,當與所需蛋白質的C末端融合時,它僅與AviTag反應。它將在Western印跡上鑒定C末端融合物,并已固定在瓊脂糖珠上以用于純化。該抗體將識別生物素化的和未生物素化的AviTag。

AbC抗體-抗C末端AviTag MAB

純化的單克隆IgG以1mg / ml的形式提供在PBS中,可用作ELISA,western印跡或任何免疫程序中的任何一抗。使用固定的AviTag肽的親和柱純化單克隆IgG。

免疫印跡協議

AbC抗體規格表

AbCA瓊脂糖-抗C末端AviTag MAB瓊脂糖將純化的抗C末端AviTag MAB與瓊脂糖綴合,以創建C末端融合Avitag蛋白的親和柱。只要不使用還原劑,可以使用通過常規方法生成的細胞提取物。高鹽濃度和大多數離子型去污劑不會抑制樹脂的結合能力。

從柱上洗脫不需要的蛋白質后,可以使用任何典型的洗脫抗原-抗體復合物的方法(pH改變等)洗脫結合的蛋白質。如果目標蛋白質對pH敏感,我們建議使用湯普森溫和的洗脫方法等用于親和純化RNA聚合酶(Thompson NE,Hager,DA和Burgess,RR(1992)Biochemistry 31,7003-7008; Thompson NE和Burgess,RR(1994)Protein Expression and Purification 5,468-475)樹脂再生通過將樹脂放入PBS中。樹脂可以多次使用(大于15種洗脫液)

每個訂單提供2毫升樹脂。這將平均純化1mg的維他命蛋白。

BIS-300陽性對照底物生物素化程度的確定BIS-300試劑盒在C端包含*生物素化和*未生物素化的麥芽糖結合蛋白,以及Avitag(MBP-AviTag)。它們用于在修改的ELISA方案中生成標準曲線。通過與已知量的*生物素化的MBP-AviTag蛋白進行比較,來測定測試蛋白的生物素化程度。

標準蛋白和未知蛋白以已知蛋白量吸附到96孔板的孔中。通過與鏈霉親和素綴合的堿性磷酸酶的相互作用來檢測與AviTag相關的生物素。吸附后洗滌樣品時,去除了多余的生物素,從而消除了詳盡的透析步驟。只能檢測到1ng的生物素化蛋白質(與基于HABA的測定相反)。該測定取決于測試蛋白質與96孔板塑料結合的能力。在C末端試劑盒中具有Avitag的*生物素化和*非生物素化的麥芽糖結合蛋白也可以用作蛋白質印跡或其他應用的對照樣品。

北京華新康信生物科技有限公司專注于生命科學領域,由豐富從業經驗的技術團隊和管理團隊組建而成,主營生物化學試劑,儀器,實驗耗材等。

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呈遞抗C末端的單克隆抗體

開發了一種單克隆抗體,當與所需蛋白質的C末端融合時,它僅與AviTag反應。它將在Western印跡上鑒定C末端融合物,并已固定在瓊脂糖珠上以用于純化。該抗體將識別生物素化的和未生物素化的AviTag。

AbC抗體-抗C末端AviTag MAB

純化的單克隆IgG以1mg / ml的形式提供在PBS中,可用作ELISA,western印跡或任何免疫程序中的任何一抗。使用固定的AviTag肽的親和柱純化單克隆IgG。

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AbC抗體規格表

AbCA瓊脂糖-抗C末端AviTag MAB瓊脂糖將純化的抗C末端AviTag MAB與瓊脂糖綴合,以創建C末端融合Avitag蛋白的親和柱。只要不使用還原劑,可以使用通過常規方法生成的細胞提取物。高鹽濃度和大多數離子型去污劑不會抑制樹脂的結合能力。

從柱上洗脫不需要的蛋白質后,可以使用任何典型的洗脫抗原-抗體復合物的方法(pH改變等)洗脫結合的蛋白質。如果目標蛋白質對pH敏感,我們建議使用湯普森溫和的洗脫方法等用于親和純化RNA聚合酶(Thompson NE,Hager,DA和Burgess,RR(1992)Biochemistry 31,7003-7008; Thompson NE和Burgess,RR(1994)Protein Expression and Purification 5,468-475)樹脂再生通過將樹脂放入PBS中。樹脂可以多次使用(大于15種洗脫液)

每個訂單提供2毫升樹脂。這將平均純化1mg的維他命蛋白。

BIS-300陽性對照底物生物素化程度的確定BIS-300試劑盒在C端包含*生物素化和*未生物素化的麥芽糖結合蛋白,以及Avitag(MBP-AviTag)。它們用于在修改的ELISA方案中生成標準曲線。通過與已知量的*生物素化的MBP-AviTag蛋白進行比較,來測定測試蛋白的生物素化程度。

標準蛋白和未知蛋白以已知蛋白量吸附到96孔板的孔中。通過與鏈霉親和素綴合的堿性磷酸酶的相互作用來檢測與AviTag相關的生物素。吸附后洗滌樣品時,去除了多余的生物素,從而消除了詳盡的透析步驟。只能檢測到1ng的生物素化蛋白質(與基于HABA的測定相反)。該測定取決于測試蛋白質與96孔板塑料結合的能力。在C末端試劑盒中具有Avitag的*生物素化和*非生物素化的麥芽糖結合蛋白也可以用作蛋白質印跡或其他應用的對照樣品。

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